Vincenzo Scamozzi, der gerade das Teatro Olimpico in Vicenza gebaut hatte, entwarf 1588 ein Projekt für ein Hoftheater des Herzogs Vespasiano, das zwischen 1588 und 1590 fertig gestellt wurde. Das elegante Äußere weist zwei Ordnungen auf: die untere mit Fenstern, Portalen und mit Quadersteinen bearbeiteten Ecken, die auf einem hohen Sockel ruhen, und die obere, die durch dorische, gekoppelte Pilaster, Nischen und Fenster gekennzeichnet ist, die von dreieckigen und geschwungenen Tympanons mit eiförmigen Schalen überragt werden. Die Schnur trägt in Großbuchstaben die Inschrift ROMA QVANTA FVIT IPSA RVINA DOCET (die Ruinen selbst lehren uns, wie groß Rom war), ein Motto, das sich auf der Titelseite von zwei der sieben Bücher über Architektur des Bolognesers Sebastiano Serio findet. Der rechteckige Saal ist in zwei Quadrate unterteilt, die durch das kurze rechteckige Orchester getrennt sind: das eine wird von der Bühne eingenommen, das andere von der halbkreisförmigen Cavea. Eine Neuerung ist der den Künstlern (Musikern und Schauspielern) vorbehaltene Eingang auf der Rückseite, der den Zugang zu den Garderoben ermöglicht. Auf der erhöhten Bühne befand sich die von Scamozzi entworfene und in der zweiten Hälfte des 18. Jahrhunderts zerstörte feste Szene, die eine städtische Perspektive darstellt, eine von adeligen und bürgerlichen Gebäuden gesäumte Straße. Das Gefühl der Tiefe wurde durch die Neigung der Bühne und die Zwischendecke, ein Tonnengewölbe aus ineinander verschlungenem Flussschilf, das blau gestrichen und verputzt war und sich über die Bühne neigte, noch verstärkt. Die Gebäude auf der Bühne waren aus Holz, Stuck und bemalten Leinwänden in Marmor- und Steinimitation gefertigt. Die Fresken an den Seiten der Bühne waren Teil der Szene und ergänzten Scamozzis perspektivische Ansicht. Auf der einen Seite ist die Werkstatt eines Cerusico-Barbieres zu erkennen. Vom ursprünglichen Bauwerk ist nur noch die harmonische Loggia mit einem Kranz von Statuen erhalten, die die wichtigsten olympischen Götter darstellen. Die Statuen der Götter und die eleganten Stuckleisten wurden von dem venezianischen Bildhauer Bernardino Quadri nach einem Entwurf von Scamozzi geschaffen. Die monochrom gemalten Figuren an der Rückwand der Loggia stellen römische Kaiser dar. In den Nischen befinden sich vier Büsten, die die Göttin Kybele und drei antike Condottieri darstellen. Die beiden großen Wandfresken stellen antike Triumphbögen dar, deren zentrale Torbögen den Blick auf die Stadt freigeben. Auf der linken Seite ist die Piazza del Campidoglio und auf der rechten Seite die Engelsburg zu sehen. Das Gebälk über dem Bogen auf der rechten Seite trägt die Widmung an Kaiser Rudolf II. von Habsburg, der Vespasian 1577 in den Rang eines Herzogs erhob. Die Fresken, die sich über den gesamten Umfang des Raumes unmittelbar unter dem Dach erstrecken, simulieren eine Loggia, die von Musikern, Komödianten, Damen und Rittern in den Kostümen des späten 16. Jahrhunderts belebt wird. Es besteht ein deutlicher Bezug zum Stil von Paolo Veronese, insbesondere zu den Fresken in der Villa Barbaro in Maser. Das im Februar 1590 fertiggestellte Gebäude wurde im Rahmen der Karnevalsfeierlichkeiten eingeweiht. Bis zum Tod Vespasianos gab es in Sabbioneta eine stabile, vom Herzog bezahlte Theatertruppe, danach erlebte das Theater, wie die ganze Stadt, eine lange Zeit des Niedergangs.