O Castelo de Hohentübingen ergue-se dos 372 m de altura de Schlossberg como um poderoso edifício de quatro alas renascentista com torres redondas. Os Senhores de Tübingen, que foram elevados à categoria de Conde Palatino no século XII, residiram aqui até venderem o castelo e a cidade aos Condes de Württemberg em 1342.
Como residência dos duques de Württemberg, o Castelo de Hohentübingen perdeu a sua importância já no século XVI. O arco triunfal do portal principal, construído em 1607, é particularmente valioso em termos de história da arte. É considerado uma obra-prima do final da Renascença. A universidade tomou posse das primeiras salas do palácio já em meados do século XVIII, e em 1816 o rei Wilhelm I de Württemberg transferiu todo o palácio para a universidade. A biblioteca da universidade com cerca de 60.000 volumes foi temporariamente instalada no Salão dos Cavaleiros, foi instalado um observatório na torre nordeste e foi instalado um laboratório químico na cozinha do castelo, que pode agora ser visitado como "laboratório do castelo" (ver "Visitas a museus e colecções").
O barril na adega do castelo construído pelo Duque Ulrich em 1549 é considerado o mais antigo barril de vinho gigante sobrevivente do mundo e está oficialmente listado no Livro dos Recordes do Guinness. Mede cerca de 6,80 metros de comprimento e cerca de 4,70 metros de altura. A sua capacidade é de cerca de 84.000 litros e foi enchida duas vezes com vinho. Verdadeiramente uma atracção! Só pode ser visitado durante os meses de Inverno.