El castillo de Hohentübingen se eleva desde los 372 m de altura del Schlossberg como un poderoso edificio renacentista de cuatro alas con torres redondas. Los señores de Tubinga, que fueron elevados al rango de condes palatinos en el siglo XII, residieron aquí hasta que vendieron el castillo y la ciudad a los condes de Württemberg en 1342.
Como residencia de los duques de Württemberg, el castillo de Hohentübingen perdió su importancia ya en el siglo XVI. El arco de triunfo del portal principal, construido en 1607, es especialmente valioso desde el punto de vista de la historia del arte. Se considera una obra maestra del Renacimiento tardío. La universidad se hizo cargo de las primeras habitaciones del palacio ya a mediados del siglo XVIII, y en 1816 el rey Guillermo I de Württemberg transfirió todo el palacio a la universidad. La biblioteca de la universidad, con unos 60.000 volúmenes, se alojó temporalmente en la Sala de los Caballeros, se instaló un observatorio en la torre noreste y un laboratorio químico en la cocina del castillo, que ahora puede visitarse como "laboratorio del castillo" (véase "Recorridos por museos y colecciones" ).
El barril de la bodega del castillo, construido por el duque Ulrich en 1549, se considera el barril de vino gigante más antiguo que se conserva en el mundo y figura oficialmente en el Libro Guinness de los Récords. Mide unos 6,80 metros de longitud y unos 4,70 metros de altura. Su capacidad es de unos 84.000 litros y se llenó dos veces de vino. Una verdadera atracción. Sólo puede visitarse en los meses de invierno.