De Codex Vaticanus is een van de oudste manuscripten van de Griekse Bijbel (Oud en Nieuw Testament). De Codex is vernoemd naar de plaats waar het bewaard is gebleven in de Vaticaanse Bibliotheek, waar het bewaard is sinds ten minste de 15e eeuw. Het is geschreven op 759 bladeren van vellum in unciale letters en is gedateerd paleografisch tot de 4e eeuw.
Het manuscript zou in Caesarea zijn gehuisvest in de 6e eeuw, samen met de Codex Sinaiticus, omdat ze dezelfde unieke afdelingen van hoofdstukken in de handelingen hebben. Het kwam naar Italië – waarschijnlijk uit Constantinopel-na de Raad van Florence (1438-1445).
Het manuscript is ondergebracht in de Vaticaanse Bibliotheek (gesticht door paus Nicolaas V in 1448) voor zolang het bekend is, opgenomen in de vroegste catalogus van de bibliotheek van 1475 (met schapnummer 1209) en in de catalogus van 1481. In een catalogus uit 1481 werd het beschreven als een "Biblia in tribus columnis ex membranis in rubeo" (drie kolom vellum Bijbel).