De Palatijngalerij herbergt een collectie van de belangrijkste werken van Italië uit de zestiende en zeventiende eeuw, met ongewone charme gegeven door de opstelling van de schilderijen, geplaatst met zijn rijke kaders in kamers fijn versierd met stucco in de stijl van de schilderijen van de zeventiende eeuw: zoals de oude schilderijen, die het historische voorbeeld het belangrijkste van Italië, plaatste de schilderijen volgens een criterium decoratief en esthetisch en niet wetenschappelijk. Het was de Groothertog Leopold die tussen het einde van de achttiende en het begin van de negentiende eeuw besloot om een deel van de rijke collecties van de Medici van de Uffizi naar het Pitti paleis te verplaatsen om redenen van ruimte. Vandaag is het het eerste museum in Florence voor het aantal tentoongestelde werken. De werken van Pontormo, Filippo Lippi, Raffaello (Madonna della Seggiola, La Velata), Tiziano (Maddalena Penitente) en Andrea del Sarto, werken van Florentijnse meesters uit de zestiende en zeventiende eeuw en werken van Caravaggio, Rubens (Le conseguenza della guerra), Van Dyck, Salvator Rosa.
