De Palatijngalerij herbergt een van de belangrijkste collecties in Italië van werken van de zestiende en zeventiende centuries.It heeft een charme niet gebruikelijk, zoals door de opstelling van de schilderijen, geplaatst met hun rijke vormstukken in kamers fijn versierd met stucco in de stijl van fotogalerijen van de zeventiende eeuw: zoals de oude, met betrekking tot de collecties, in feite, is het belangrijkste historische voorbeeld in Italië, plaatst de schilderijen in een politiek decoratief en esthetisch en niet wetenschappelijk. Het was de Groothertog Leopold tussen het einde van de achttiende en het begin van de negentiende eeuw die besloot om een deel van de rijke Medici collecties van de Uffizi over te dragen naar Palazzo Pitti om redenen van ruimte. Vandaag is het het eerste museum in Florence voor het aantal tentoongestelde werken. De werken van Pontormo, Filippo Lippi, Raffaello (Madonna della Seggiola, La Velata), Titiaan (Maddalena Penitente) en Andrea del Sarto, werken van de Florentijnse meesters van de vijftiende en zeventiende eeuw en werken van Caravaggio, Rubens (de gevolgen van de oorlog), Van Dyck, Salvator Rosa.