Hohentübingen Slot rejser sig fra det 372 m høje Schlossberg som en mægtig firefløjet renæssancebygning med runde tårne. Her boede herremændene af Tübingen, som i det 12. århundrede blev ophøjet til pfalzgreve, indtil de i 1342 solgte slottet og byen til greverne af Württemberg.
Som residens for de württembergske hertuger mistede slottet Hohentübingen sin betydning allerede i det 16. århundrede. Triumfbuen i hovedportalen, der blev bygget i 1607, er særlig kunsthistorisk værdifuld. Den anses for at være et mesterværk fra senrenæssancen. Universitetet overtog de første værelser i slottet allerede i midten af det 18. århundrede, og i 1816 overdrog kong Wilhelm I af Württemberg hele slottet til universitetet. Universitetsbiblioteket med ca. 60.000 bind blev midlertidigt indrettet i riddersalen, et observatorium blev indrettet i det nordøstlige tårn og et kemisk laboratorium blev indrettet i slotskøkkenet, der nu kan besøges som "slotslaboratorium" (se "Rundvisninger gennem museer og samlinger" ).
Tønden i slotskælderen, der blev bygget af hertug Ulrich i 1549, anses for at være den ældste bevarede kæmpevinstønde i verden og er officielt optaget i Guinness Rekordbog. Den måler ca. 6,80 meter i længden og ca. 4,70 meter i højden. Dens kapacitet er på omkring 84 000 liter og blev fyldt to gange med vin. Virkelig en attraktion! Kan kun besøges i vintermånederne.
