Istana Hohentübingen menjulang dari Schlossberg setinggi 372 m sebagai bangunan bersayap empat Renaissance yang hebat dengan menara bulat. Lords of Tübingen, yang dinaikkan pangkat Count Palatine pada abad ke-12, tinggal di sini sehingga mereka menjual istana dan bandar kepada Counts of Württemberg pada tahun 1342.Sebagai kediaman duke Württemberg, Istana Hohentübingen kehilangan kepentingannya seawal abad ke-16. Gerbang kejayaan portal utama, dibina pada 1607, amat berharga dari segi sejarah seni. Ia dianggap sebagai karya agung Renaissance lewat. Universiti mengambil alih bilik pertama di istana seawal pertengahan abad ke-18, dan pada tahun 1816 Raja Wilhelm I dari Württemberg memindahkan seluruh istana ke universiti. Perpustakaan universiti dengan kira-kira 60,000 jilid ditempatkan buat sementara waktu di Dewan Kesatria, sebuah balai cerap didirikan di menara timur laut dan makmal kimia telah didirikan di dapur istana, yang kini boleh dilawati sebagai "makmal istana" (lihat "Lawatan melalui muzium dan koleksi" ).Tong di ruang bawah tanah istana yang dibina oleh Duke Ulrich pada tahun 1549 dianggap sebagai tong wain gergasi tertua yang masih hidup di dunia dan secara rasmi disenaraikan dalam Buku Rekod Guinness. Ia berukuran sekitar 6.80 meter panjang dan sekitar 4.70 meter tinggi. Kapasitinya adalah sekitar 84,000 liter dan diisi dua kali dengan wain. Benar-benar tarikan! Hanya boleh dilawati pada musim sejuk.