C'est Vincenzo Scamozzi, tout juste sorti de la construction du Teatro Olimpico de Vicence, qui, en 1588, élabore un projet de théâtre de cour pour le duc Vespasiano, qui sera achevé entre 1588 et 1590. L'élégant extérieur présente deux ordres : l'ordre inférieur, avec des fenêtres, des portails et des angles contournés en pierre de taille reposant sur une haute plinthe, et l'ordre supérieur, caractérisé par des pilastres couplés doriques, des niches et des fenêtres surmontées de tympans triangulaires et courbes contenant des coupes ovoïdes. Le cordon porte l'inscription en majuscules ROMA QVANTA FVIT IPSA RVINA DOCET (les ruines elles-mêmes nous enseignent la grandeur de Rome), une devise que l'on retrouve sur la page de titre de deux des sept livres d'architecture écrits par le Bolognais Sebastiano Serio. La salle rectangulaire est divisée en 2 carrés séparés par le court orchestre rectangulaire : l'un occupé par la scène et l'autre par la cavea semi-circulaire. Une innovation est l'entrée à l'arrière réservée aux artistes (musiciens et acteurs), qui permet d'accéder aux loges. Sur la scène surélevée se trouvait la scène fixe conçue par Scamozzi, détruite dans la seconde moitié du XVIIIe siècle, qui représente une perspective urbaine, une rue bordée de bâtiments nobles et bourgeois. La sensation de profondeur était accentuée par l'inclinaison de la scène et le faux plafond, une voûte en berceau faite de roseaux de rivière entrelacés, stuqués et peints en bleu, qui s'inclinait au-dessus de la scène elle-même. Les bâtiments de la scène étaient en bois, en stuc et en toile peinte, en imitation marbre et en imitation pierre. Les fresques sur les côtés de la scène faisaient partie de la scène et complétaient la vue en perspective de Scamozzi. D'un côté, l'atelier d'un cerusico-barbier est reconnaissable. Tout ce qui reste de la structure originale est l'harmonieuse loggia avec une couronne de statues représentant les principaux dieux de l'Olympe. Les statues des dieux et les élégantes moulures en stuc ont été réalisées par le sculpteur vénitien Bernardino Quadri d'après un projet de Scamozzi. Les figures peintes en monochrome sur le mur arrière de la loggia représentent des empereurs romains. Dans les niches se trouvent quatre bustes représentant la déesse Cybèle et trois condottieri antiques. Les deux grandes fresques murales représentent d'anciens arcs de triomphe, dont les arcs centraux offrent des vues sur la ville. À gauche est peinte la Piazza del Campidoglio et à droite le Castel Sant'Angelo. L'entablement au-dessus de l'arc de droite porte la dédicace à l'empereur Rodolphe II de Habsbourg, qui a élevé Vespasien au rang de duc en 1577. Les fresques qui courent sur tout le périmètre de la pièce située immédiatement sous le toit simulent une loggia animée par des musiciens, des comédiens, des dames et des chevaliers vêtus des costumes de la fin du XVIe siècle. Il y a une référence claire au style de Paolo Veronese, en particulier aux fresques de Villa Barbaro à Maser. L'édifice, achevé en février 1590, est inauguré à l'occasion des fêtes du carnaval. Une troupe de théâtre stable, payée par le duc, est restée à Sabbioneta jusqu'à la mort de Vespasiano, après quoi le théâtre, comme toute la ville, a connu une longue période de déclin.