הגלריה מכילה אוסף של העבודות החשובות ביותר של איטליה של המאה ה-16 וה-17, עם קסם יוצא דופן שניתן על ידי סידור הציורים, אשר הונח בחדריה העשירים ומעוטרים בצורה מסודרת היטב עם סטוקו בסגנון המאה ה-17: כמו הציורים הישנים, שהיא הדוגמה ההיסטורית החשובה ביותר של איטליה, הניחה את הציורים במעטפת דקורטיבית על פי יצורי והקישוט. היה זה לאופולד הדוכס הגדול, שבין סוף המאה ה-18 לתחילת המאה ה-19, החליט להעביר חלק מהאוספים העשירים של אופיצי לארמון פיטי מסיבות של חלל. כיום זהו המוזיאון הראשון בפירנצה עבור מספר העבודות המוצגות. הוא כולל עבודות של פונטורו, פיליפו ליפי, רפאלו (מדונה דלה סגיולה, לה ולטה), טיציאן (מדלנה פניטנטה) ואנדריאה דל סרטו (Filippo Lippi), עובדת על ידי המאסטרים הפלורנטינים (sixteenth andrea del Sante masters of the sevaggiola, Rubagio, rubens (le consegnioni della guerra), ואן דייק, Salvator.
