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Le Codex Vaticanus est l'un des plus anciens manuscrits de la Bible grecque (Ancien et Nouveau Testament) qui existent encore. Le Codex doit son nom à son lieu de conservation à la Bibliothèque du Vatican, où il est conservé depuis le XVe siècle au moins. Il est écrit sur 759 feuilles de vélin en lettres onciales et a été daté paléographiquement au 4e siècle.
On pense que le manuscrit a été conservé à Césarée au VIe siècle, avec le Codex Sinaiticus, car ils ont les mêmes divisions uniques de chapitres dans les Actes. Il est arrivé en Italie - probablement de Constantinople - après le Concile de Florence (1438-1445).
Le manuscrit est conservé à la Bibliothèque du Vatican (fondée par le pape Nicolas V en 1448) depuis aussi longtemps qu'il est connu. Il figure dans le premier catalogue de la bibliothèque, datant de 1475 (avec le numéro de rayon 1209), et dans le catalogue de 1481. Dans un catalogue de 1481, elle était décrite comme une "Biblia in tribus columnis ex membranis in rubeo" (Bible en vélin à trois colonnes).
