Der Sala dello Zodiaco (Saal des Tierkreises) war das Schlafzimmer von Guglielmo Gonzaga und einer der interessantesten Räume des Palastes. An der Decke befindet sich ein astronomisches Fresko von Lorenzo Costa dem Jüngeren aus dem Jahr 1579, das den von Hunden gezogenen Wagen der Diana inmitten von Sternbildern zeigt. Das Zimmer war auch Napoleons Schlafzimmer während der Napoleonischen Kriege. Das Zimmer war daher auch als Napoleons Zimmer bekannt. Der Krater (Becher) der Opfer und Trankopfer spielt auf die Unsterblichkeit der Familie Gonzaga an. Der Rabe, ein dem Apollo heiliger Vogel, wurde von dem Gott in ein Sternbild verwandelt. Das Zeichen der Jungfrau, mit dem Ohr in der Hand, nimmt das Aussehen von Astrea und Ceres an und ist das Emblem von Vincenzo Gonzaga. Das Firmament dreht sich um den Wagen der Diana, der von einer Hundemeute gezogen wird. Die schwangere Göttin ist die Verklärung von Eleonora von Österreich, der Frau des Herzogs von Mantua. Nach der alten Überlieferung hält der Skorpion das Zeichen Waage in seinen Klauen.
