El Palatí Galeria acull una col·lecció de les obres més importants de la Itàlia del segle XVI i XVII, amb inusual encant donada per la disposició de les pintures, realitzades amb el seu ric marcs en habitacions ben decorades amb motllures a l'estil de les pintures del segle XVII: com les pintures antigues, que és l'exemple històric més important d'Itàlia, col·locat les pintures d'acord amb un criteri i decorativa estètica i no científic. Va ser el Gran Duc Leopold que, entre finals del segle xviii i principis del xix, va decidir traslladar una part de la riquesa de les col·leccions de la Medici dels Uffizi a la Pitti Palace per raons d'espai. Avui és el primer museu a Florència el nombre d'obres exposades. Disposa d'obres de Pontormo, Filippo Lippi, Rafael (Madonna della Seggiola, La Velata), Tiziano (Maddalena Penitente) i Andrea del Sarto, obres de Florentino mestres dels segles xvi i xvii i obres de Caravaggio, Rubens (Le conseguenza della guerra), Van Dyck, Salvator Rosa.