Galeria Palatină găzduiește o colecție dintre cele mai importante lucrări din Italia secolelor XVI-XVII, cu farmec neobișnuit dată de aranjamentul de picturi, plasat cu o bogata cadre în camerele fin decorate cu stuc în stil de picturi din secolul al XVII-lea: ca cel vechi picturi, care este de exemplu istoric cel mai important din Italia, a pus picturi în funcție de un criteriu decorative și estetice și nu științifice. Marele Duce Leopold a fost cel care, între sfârșitul secolului al XVIII-lea și începutul secolului al XIX-lea, a decis să mute o parte din bogatele colecții ale Medici din Uffizi la Palatul Pitti din motive de spațiu. Astăzi este primul muzeu din Florența pentru numărul de lucrări expuse. Acesta dispune de lucrări de Pontormo, Filippo Lippi, Raffaello (Madonna della Seggiola, La Velata), Tiziano (Maddalena Penitente) și Andrea del Sarto, lucrări de Florentin maeștri din secolele xvi-xvii și lucrări de Caravaggio, Rubens (Le fiecărei epoci îi corespunde della guerra), Van Dyck, Salvator Rosa.
