Mosaik lantai Katedral berukuran cukup besar, membentang di sepanjang nave utama, dan terdiri dari sekitar 600.000 tesserae polikrom dengan komposisi batu kapur lokal. Mosaik ini menggambarkan Pohon Kehidupan dan ditugaskan oleh Uskup Gionata pada tahun 1163 dan direalisasikan oleh biarawan Pantaleone dari Biara S. Nicola di Casale di Otranto, yang menyelesaikan karya agung ini pada tahun 1165.Keunikan pertama dari mosaik ini adalah fakta bahwa nama pembuatnya terukir di atasnya, sesuai dengan pintu masuk utama, sebuah fakta yang setidaknya tidak biasa pada saat itu dan mungkin karena hak istimewa untuk memberikan penghargaan kepada seniman sebagai ucapan terima kasih atas keberhasilan karya yang luar biasa.Seperti yang telah disebutkan, makna yang diberikan oleh sebagian besar ahli terhadap representasi tersebut adalah Pohon Kehidupan, tetapi ada teori kontroversial dan tidak ada kesimpulan yang pernah dicapai yang memuaskan semua aliran pemikiran, meninggalkan selubung misteri yang mengelilingi karya tersebut.Yang jelas, bagaimanapun, adalah bahwa di sekitar pohon itu, yang membentang dari pintu masuk ke presbiterium, banyak adegan dari Perjanjian Lama terbentang, melambangkan jalan berliku yang diambil oleh manusia untuk mengatasi dosa dan mencapai keselamatan abadi: peristiwa Adam dan Hawa, peristiwa Kain, Habel, konsepsi Neraka dan Firdaus. Tidak ada kekurangan referensi mitologi dan sejarah seperti Raja Arthur dan Alexander Agung. Yang juga sangat mencolok adalah penggambaran dua belas bulan dalam setahun yang didedikasikan untuk bagian melingkar serta representasi kerja musiman relatif.Kekayaan dan keragaman elemen dan simbol yang ada merupakan bukti lebih lanjut tentang bagaimana Otranto selalu mewakili titik temu antara budaya, masyarakat, dan arus seni dan budaya yang berbeda. Posisi geografis yang dimiliki kota ini telah memfasilitasi pertemuan dan pertukaran antara Barat dan Timur, yang sering kali membuat kota ini menjadi sasaran serangan dan invasi yang lebih memilih untuk memaksakan budaya mereka. Setelah ribuan tahun sejarah, yang tersisa adalah serangkaian harta karun, jejak, tanda-tanda perjalanan orang-orang yang berbeda, yang telah memperkaya kekayaan Otranto dan terutama dari sudut pandang artistik.