Palatine Galleri inrymmer en samling av de viktigaste verk i Italien av sextonde och sjuttonde århundradet, med ovanlig charm ges av arrangemanget av målningarna, placerade med sina rika ramar i rum fint inredda med stuckatur i stil med målningar av sjuttonhundratalet: som de gamla målningar, som är det historiska exemplet viktigaste i Italien, placerade målningarna enligt ett kriterium dekorativa och estetiska och inte vetenskapliga. Det var storhertigen Leopold som, mellan slutet av artonde och början av nittonde århundradet, bestämde sig för att flytta en del av de rika samlingarna av Uffiziernas Medici till Pittipalatset av rymdskäl. Idag är det det första museet i Florens för antalet verk utställda. Här finns verk av Pontormo, Filippo Lippi, Raffaello (Madonna della Seggiola, La Velata), Niclas (Maddalena Penitente) och Andrea del Sarto, verk av den Florentinska mästare i den sextonde och sjuttonde århundradena och verk av Caravaggio, Rubens (Le conseguenza della guerra), Van Dyck, Salvator Rosa.