Pendirian Studium telah diisytiharkan oleh Maharaja Frederick II dari Swabia pada 5 Jun 1224 (5 Julai mengikut beberapa sumber) melalui surat pekeliling (general lictera) yang dihantar dari Syracuse. Oleh kerana ia dicipta atas kehendak maharaja sendiri, Universiti Naples dianggap setakat ini sebagai universiti sekular pertama di Eropah jenis negara (iaitu, tidak diasaskan oleh syarikat atau persatuan intelektual atau pelajar tetapi berdasarkan peruntukan berdaulat).Terdapat dua sebab utama yang mendorong maharaja untuk membina Studium: pertama latihan eksklusif kakitangan pentadbiran dan birokratik curia regis (kelas pemerintah kerajaan) dan kemudian penyediaan para fuqaha yang akan membantu pemerintah dalam menentukan sistem negara dan dalam pelaksanaan undang-undang; kedua, untuk memudahkan subjek seseorang dalam pembentukan budaya, mengelakkan mereka perjalanan yang sia-sia dan mahal ke luar negara.Pilihan lokasi jatuh di Naples bukan sahaja atas sebab budaya (bandar itu mempunyai tradisi yang panjang dalam hal ini, dikaitkan dengan sosok Virgil, yang secara jelas dirujuk dalam dokumen masa itu), tetapi juga atas sebab geografi dan ekonomi (lalu lintas melalui laut, iklim sederhana dan kedudukan strategik dalam Kerajaan, dalam cara tertentu, menentukan). Untuk organisasi Studium, karya dua ahli hukum terkemuka dari Campania telah digunakan: Pier delle Vigne dan Taddeo da Sessa.
