W Galerii palatyńskiej znajduje się jedna z najważniejszych kolekcji dzieł Włoch z XVI i XVII wieku, z niezwykłym urokiem nadanym układowi obrazów umieszczonych z bogatymi ramami w drobno zdobionych sztukaterią salach w stylu XVII-wiecznych obrazów: podobnie jak stare obrazy, z których jest najważniejszym historycznym przykładem Włoch, obrazy są umieszczane zgodnie z kryterium dekoracyjnym, estetycznym i nienaukowym. Był to wielki książę Leopold, który na przełomie XVIII i XIX wieku postanowił przenieść część bogatych zbiorów Medyceuszy z Uffizi do Pałacu Pitti ze względów przestrzennych. Dziś jest to pierwsze muzeum Florencji pod względem liczby wystawionych prac. Zawiera prace Pontormo, Filippo Lippi, Raffaello (Madonna della Seggiola, La Velata), Tycjana (Penitent Maddalena) i Andrei del Sarto, dzieła florenckich Mistrzów XVI i XVII wieku oraz dzieła Caravaggia, Rubensa (Le goetenze della Guerra), Van Dijka, Salvatora rosy.
