Basilikan heliga graven står längs Via Francigena, och enligt en legendarisk tradition kyrkan grundades av drottning Matilda av Westfalen, direkt till Rom med en husvagn av mulor lastade med guld för att bygga en helgedom tillägnad den heliga graven. I Acquapendente skulle mulorna "frysa", knäböja och vägra att lämna igen, och under natten skulle suveränen ha en dröm som skulle få henne att genomföra sitt projekt på denna plats. Byggnaden går tillbaka till XII-talet och var ursprungligen i romansk stil och tillhör Benedictine order, med bifogade kloster. Kyrkans nuvarande utseende är resultatet av många ingrepp: fasaden går tillbaka till 700 - talet och är Nicola Salvis arbete (arkitekten av Trevi-fontänen i Rom), sedan delvis modifierad på grund av skadorna från det senaste kriget. På fasaden reproduceras bysten av påven Innocent X Pamphili (originalet av Alessandro Algardi hålls på Stadsmuseet), som beror på överföringen av stiftet till Acquapendente, efter förstörelsen av Castro. Internt har kyrkan en latinsk korsplan med 3 Naves, presbyteriet höjs för att lämna utrymme för kryptan nedan. Kryptan är av typen" hall", byggd på 24 kolumner där vila korsar valv. Det bevarar en SACELLO som fortfarande är en pilgrimsfärd destination, som är den äldsta kopian i världen av Jesu grav.Därför kallas Acquapendente också Jerusalem i Europa. Kopian av den heliga graven går tillbaka till tionde århundradet och runt, ett par århundraden senare byggdes kryptan där. Inuti är en sten, som sägs ha förts dit av korsfararna och badade i Kristi blod. Det är därför Acquapendente är fortfarande ett viktigt stopp på pilgrimsfärden längs Via Francigena.
