Elle se trouve dans le centre historique d'Ostuni, la belle cathédrale du 15e siècle, dédiée à Santa Maria dell'Assunzione, monument national depuis 1902, qui se dresse au sommet de la plus haute colline de la ville blanche. Rénovée à la fin du XVe siècle, après un fort tremblement de terre, la cathédrale possède une façade majestueuse avec trois portails, surmontée de trois rosaces, dont celle du centre, un triomphe du symbolisme médiéval, avec 24 rayons formés par des colonnes et des arcs et au centre la figure du Christ, entouré des apôtres et de sept têtes d'angelots, tenant la terre en signe de protection. En forme de croix latine, l'intérieur de l'église est divisé en trois nefs séparées par des arcs de 5 colonnes. La nef centrale possède trois magnifiques peintures du XVIIIe siècle, avec des scènes de la vie de Jésus, placées au plafond, et de fascinantes peintures consacrées au saint patron Oronzo et au martyre de saint Blaise.